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Leitura garantida de 700 bases, com QV>20
discount cialis 24H a 48H após a chegada das amostras ao laboratório da STAB VIDA
-Nota: O prazo de entrega será alargado se o pedido de sequenciação incluir outros serviços, nomeadamente a encomenda de primers, purificações, amplificações,
discount cialis O serviço de sequenciação da STAB VIDA está optimizado para DNA plasmídico purificado, produtos PCR purificados e produtos PCR não purificados. A qualidade e concentração dos DNAs são fundamentais para a obtenção de resultados que passem nos nossos padrões de qualidade. Aconselhamos a utilização de kits comerciais na preparação dos DNA’s. Para a eluição das amostras deve-se utilizar MQ H2O estéril ou 5 mM Tris-HCl (pH 8.0 – 9.0). Desaconselhamos a purificação por extracção de gel, caso tenha de recorrer a este método por favor contacte-nos antes de enviar as amostras.
Pode enviar as suas amostras e primers em tubos de 1.5ml, 0,5ml, 0.2ml, placas de 96 poços ou Strips 8-well. Não utilize parafilme, preferencialmente utilize tubos que vedem adequadamente para evitar derrame ou evaporação, no caso das placas sugerimos a utilização de filme autocolante para vedar as placas de modo a evitar contaminação cruzada.
discount cialis O volume mínimo recomendado de DNA é 15µl, idealmente 20µl caso seja necessário efectuar alguma repetição.Em cada sequenciação são utilizados 500ng de DNA plasmídico ou cerca 50ng para produtos de PCR. Os primers devem ser enviados a uma concentração de 10pmol/µl com um volume mínimo de 5µl. Caso seja para utilizar o mesmo primer em menos de 10 sequenciações deverá enviar 3µl por sequenciação (ex: para 4 sequenciações deverá enviar no mínimo 12µl), para mais de 10 sequenciações deve ser enviado 2µl de primer por sequenciação (ex: 30µl para 15 sequenciações).
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DNA plasmídico: 100ng/ulProduto PCR <300pb: 10ng/ul
Produto PCR 300-600pb : 20ng/ulProduto PCR >600pb: 30ng/ul
O basecalling (atribuição de bases a cada pico do electropherograma) dos electropherogramas é completamente automático e não editável manualmente, a cada nucleótido é atribuído uma probabilidade de certeza, designado por Phred quality score.Na sequenciação de plasmídeos e produtos de PCR, a STAB-Vida utiliza o método de Sanger. Os reagentes correntemente utilizados são provenientes da Applied Biosystems, utilizando-se BigDye Terminator 3. A reacção de sequenciação é purificada por filtração em gel e corrida num sequenciador ABI 3730XL.
